标题:
IL-17、IL-22和IL-23对成骨细胞的不同调节作用
讲者:
张静如
单位:
浙江省中医院
播放:
1890
论文摘要:
目的:明确IL-17受体(IL-17RA、IL-17RC)、IL-22受体(IL-10R2、IL-22R1)和IL-23受体(IL-12Rβ1、IL-23R)在原代成骨细胞以及三种成骨样细胞株Saos-2、C2C12和MC3T3-E1中的表达情况,IL-17、IL-22和IL-23对成骨细胞增殖和分化的影响。
方法:从新生SD大鼠(出生3天)颅盖骨提取原代成骨细胞,用RT-PCR以及实时定量RT-PCR检测原代成骨细胞及成骨样细胞株Saos-2、MC3T3-E1和C2C12在静息状态和骨形成蛋白-2(BMP-2,300ng/ml)诱导分化后, IL-17RA、IL-17RC、IL-10R2、IL-22R1、IL-12Rβ1和IL-23R基因表达水平及变化情况。分别采用CCK-8实验和流式细胞术检测原代成骨细胞在IL-17、IL-22及IL-23刺激后细胞增殖及细胞周期变化情况。采用RT-PCR及实时定量RT-PCR检测碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)和Runx-2基因表达,采用细胞ALP活力检测和ALP染色实验分析IL-17、IL-22及IL-23对原代成骨细胞分化的影响。
结果:原代成骨细胞表达IL-17受体,但不表达IL-22和IL-23受体。在三种成骨样细胞株中,IL-17、IL-22和IL-23受体基因均无表达。IL-17、IL-22及IL-23对原代成骨细胞的生长增殖和细胞周期均无明显影响。IL-17抑制原代成骨细胞ALP、OCN和Runx-2的基因表达,而IL-22和IL-23对ALP、OCN和Runx-2基因表达无明显影响;原代成骨细胞在不同浓度的IL-17的刺激下ALP活力逐渐降低、ALP的数量逐渐减少。IL-17对成骨细胞分化过程中的Smad蛋白无明显影响。
结论:大鼠原代成骨细胞表达IL-17受体基因,不表达IL-22和IL-23受体;三种成骨样细胞株C2C12细胞、Saos-2细胞和MC3T3-E1细胞均不表达IL-17、IL-22和 IL-23受体。IL-17抑制原代成骨细胞分化,但对成骨细胞增殖无明显影响;IL-22和 IL-23对原代成骨细胞增殖和分化均无明显影响。