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袁海云:胎羊体外循环通过miR-34a/DSCR1通路导致胎盘功能失调 PPT讲座视频第18届中国南方国际心血管病学术会议

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标题：胎羊体外循环通过miR-34a/DSCR1通路导致胎盘功能失调

讲者：袁海云

单位：广东省心血管病研究所，广东省人民医院，广东省医学院

关键词：

胎儿治疗体外循环微RNA 炎症胎盘功能不全

播放： 1671

论文摘要：

目的胎儿体外循环导致胎盘功能障碍的机制未明。我们前期研究认为与NF-κB通路过度激活有关，但不能通过抑制NF-κB的激活来逆转上述过程。MicroRNAs是一种近期发现的重要调控分子，参与各种病理生理过程的调控。本文重点研究microRNAs在调控NF-κB通路激活过程中的角色和作用；

方法取山羊作为实验动物，收集胎羊体外循环前和体外循环后的胎盘标本（n=6）。采用microRNA芯片和荧光定量PCR（RT-qPCR）技术检测胎盘体外循环前后的microRNAs的表达差异。使用生物信息学和荧光素酶双报告实验发现特定microRNA的可能靶基因。将特定microRNA转染入血管内皮细胞，行靶基因的qRT-PCR和蛋白印记（WB）实验，并随后进行细胞功能实验。通过对胎盘组织进行原位杂交（FISH）和免疫组化（IHC）实验，体内验证特定microRNA及其靶基因的在胎盘组织中的差异性表达。

结果 MicroRNA芯片和RT-qPCR提示miR-17、miR-34a、miR-221以及miR-21在体外循环后的胎盘组织中恒定高表达，其中miR-34a表达最稳定。生物信息学和荧光素酶双报告实验证明钙神经素调节因子1（DSCR1）为miR-34a的直接靶基因。qRT-PCR和WB表明DSCR1蛋白在胎盘组织中低表达，而活化T细胞核因子（NFAT）、细胞间粘附分子1（ICAM1）、血管细胞粘附分子1（VCAM1）以及核因子κB（NF-κB）高表达。FISH和IHC结果提示miR-34a、DSCR1、NFAT、ICAM1、VCAM1和NF-κB主要在胎盘血管内皮中差异性表达。体外实验结果提示miR-34a影响血管内皮细胞增殖和迁移，miR-34a、DSCR1、NFAT、ICAM1、VCAM1和NF-κB变化趋势与胎盘组织内一致，且这种趋势能够被miR-34a的抑制剂逆转。

结论胎儿体外循环导致胎盘内皮miR-34a高表达，高表达miR-34a通过下调DSCR1进而NF-κB通路过度激活，最终导致胎盘功能失调。抑制miR-34a的过表达可能是今后防治胎盘功能失调的有效方法。

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心外科

广东省心血管病研究所

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