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李慧萍:The autism-related gene SNRPN regulates cortical and spine development via controlling nuclear receptor Nr4a1 PPT讲座视频 中华医学会第二十一次全国儿科学术大会
标题: The autism-related gene SNRPN regulates cortical and spine development via controlling nuclear receptor Nr4a1
讲者: 李慧萍
单位: 复旦大学附属儿科医院
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论文摘要: 目的 小分子核糖体蛋白多肽N(Small Nuclear Ribonucleoprotein Polypeptide N, SNRPN)是神经元特异性剪切蛋白编码基因,位于15号染色体长臂11-13(15q11-13)区域。SNRPN基因拷贝数增加或缺失与Prader-Willi综合症(PWS)、Angelman综合症(AS)、孤独症谱系障碍(ASDs)等神经发育障碍性疾病有关。SNRPN在大脑中特异性表达,但其如何影响神经发育的机制尚不明确。
方法 体外培养皮层神经元电转SNRPN过表达或RNAi质粒(质粒带GFP荧光蛋白),免疫荧光染色观察神经元神经突长度及轴突长度变化。孕14.5天胎鼠电转SNRPN过表达或RNAi质粒,出生后1天,21天分别取全脑冰冻切片,免疫荧光染色观察GFP阳性神经元迁移、树突棘密度及分布情况。Western blot、定量PCR检测SNRPN对核受体亚家族4,A组,成员1(Nr4a1)表达水平的影响。最后通过分子克隆及抑制剂调控Nr4a1表达水平,观察对SNRPN RNAi引起的神经元形态改变。
结果 SNRPN表达水平异常改变影响神经元形态。体外培养神经元过表达SNRPN,神经突及轴突外生受限,SNRPN敲减神经元神经突、轴突过度生长。在体实验发现,胚胎电转小鼠皮层神经元过表达SNRPN,转染阳性神经元迁移速度减慢,树突棘密度增高,尤其在树突远端树突棘密度增高尤为明显。Western blot及qPCR实验发现SNRPN抑制Nr4a1表达水平,Nr4a1是神经发育阶段重要的核受体。共转Nr4a1可以改善SNRPN过表达引起的树突棘分布异常。体外培养转染SNRPN RNAi质粒神经元,敲减Nr4a1或加入Nr4a1抑制剂(DIM)均可改善SNRPN下调引起的神经突过度生长。
结论 因此我们得出结论,维持SNRPN正常表达水平在皮层神经发育过程中发挥重要作用。另外,Nr4a1可能是治疗SNRPN相关神经发育障碍性疾病,包括PWS、ASDs等的潜在治疗靶点。

儿内科

复旦大学附属儿科医院

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