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丁方睿:足细胞计数方法在Alport综合征中的应用 PPT讲座视频中华医学会第二十一次全国儿科学术大会

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标题：足细胞计数方法在Alport综合征中的应用

讲者：丁方睿

单位：北京大学第一医院

关键词：

Alport综合征足细胞计数

播放： 2280

论文摘要：目的 Alport综合征是导致终末期肾脏病的疾病之一，但是，在临床中，目前现有的检测手段（肾功能和蛋白尿等）并不能完全监测到Alport综合征患者病情的轻重，部分患者出现肾功能异常和蛋白尿发生时，药物已经很难控制病情，最终导致终末期肾脏病的发生。因此，寻找及时反映Alport综合征早期病情的指标是当下研究的重点。Wiggins教授实验室已经建立一系列足细胞计数方法用以监测足细胞丢失情况。本研究将Wiggins实验室建立的尿液足细胞计数方法应用到北京大学第一医院确诊的Alport综合征患者中，以确认足细胞计数在Alport综合征病情诊断中的重要意义，并验证Alport综合征患者足细胞丢失可能与病情相关并且先于肾功能异常和蛋白尿的发生。
方法收集Alport综合征患者的尿液，通过检测尿液中podocin mRNA（podocin是足细胞特异性表达分子）的量以指示从肾脏中脱落的足细胞的量，Wiggins教授实验室将提供podocin cDNA标准品，通过 TaqMan探针-实时定量-PCR方法检测尿液中podocin的量，再通过尿液肌酐校正，最终数据将会以尿podocin mRNA：肌酐比率UpodCR所呈现。
结果在收集到的169例样本中，132例Alport综合征患者尿液作为疾病组，37例与疾病组年龄相匹配的正常人尿液样本。其中疾病组根据微量白蛋白，24h尿蛋白，肾功能是否异常分为4组。通过提取尿液RNA，逆转录到cDNA，实时探针定量PCR检测尿液中足细胞特异性分子podocin的量，通过肌酐校正得出UpodCR。其中正常人尿液UpodCR与Wiggins实验室正常人尿液UpodCR并没有差异，与正常对照组相比，疾病组UpodCR显著升高，是正常组的21倍，与Wiggins实验室结果（23倍）相比非常接近。没有微量白蛋白尿（单纯血尿组）UpodCR是正常组的4.1倍，提示我们尿液足细胞计数方法可以早期识别到AS患者疾病的病情，并且可以通过足细胞数提示疾病的风险。一些有蛋白尿或者蛋白尿肾功能不正常的患者足细胞数趋于正常，提示我们目前的治疗相对可行。
结论尿液足细胞计数方法是一种无创的早期识别AS患者病情的并给AS患者治疗提供依据的新方法。对未来前瞻性研究提供非常好的支持和依据。

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