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吴建蓉: 热休克蛋白90抑制剂逆转急性淋巴细胞白血病对糖皮质激素耐药 PPT讲座视频 中华医学会第二十一次全国儿科学术大会
标题: 热休克蛋白90抑制剂逆转急性淋巴细胞白血病对糖皮质激素耐药
讲者: 吴建蓉
单位: 四川大学华西第二医院
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论文摘要: 研究背景与目的   热休克蛋白90(HSP90)是广泛存在于真核细胞内的一类高度保守的分子伴侣蛋白,通过维持其客户蛋白的稳定和活性而间接参与调控细胞内多种重要的信号传导通路。这些客户蛋白包括与肿瘤生长相关的一些蛋白,以及糖皮质激素受体(GR)。GR在没有和糖皮质激素(GC)结合时在胞浆中和HSP90结合,使其免受降解。由于HSP90在肿瘤中常常高表达,所以它也是肿瘤治疗的重要靶点。GC是急性淋巴细胞白血病(ALL)的主要治疗药物,它是通过和其受体GR结合后进一步发挥作用的,那么使用HSP90抑制剂是否会影响GC的治疗作用呢?本研究使用HSP90抑制剂作用于T-ALL细胞株,观察其对细胞生长及其GR表达的影响,以进一步验证HSP90抑制剂能否作为ALL的治疗药物。
研究对象及方法 以T-ALL GC耐药细胞株C1及GC敏感细胞株C7为研究对象。MTT比色法检测细胞增殖,Western Blot分析自噬相关蛋白及mTOR通路蛋白的表达,流式细胞术检测凋亡和细胞周期。
结果  单用HSP90抑制剂17-AAG能明显抑制GC耐药细胞C1和敏感细胞C7的生长,尤其对C1明显。小剂量的17-AAG和地塞米松(Dex)联合应用后,明显抑制两种细胞的生长。在17-AAG使用后24小时,两种细胞GR总蛋白,以及磷酸化的GR表达水平均有下降,以前者为甚。进一步的研究发现抑制HSP90后,肿瘤相关蛋白C-MYC,NF-KB,mTOR信号蛋白等表达下调,提示抑制HSP90活性后,可能增加了肿瘤相关蛋白的降解。同时我们还发现使用17-AAG后肿瘤细胞内铁蛋白表达下调,如果事先在培养液中加入Fe3+诱导铁蛋白的表达,则17-AAG对肿瘤细胞的抑制作用被阻断,提示17-AAG对肿瘤细胞的抑制作用可能部分是通过调控铁蛋白的表达实现的。
结论  HSP90抑制剂17-AAG虽然能够促进GR蛋白的降解和下调GR磷酸化水平,但没有明显的抑制GC-GR通路的活化和GC的促ALL凋亡作用。HSP90抑制剂在ALL表现出明显的抗肿瘤活性,对GC敏感和耐药细胞都有明显的细胞生长抑制作用,和Dex连用后作用进一步增强。作用机制可能是促进了肿瘤相关蛋白的降解,以及下调铁蛋白的表达。HSP90抑制剂能够成为ALL治疗中的有效药物,尤其是对GC耐药的患者。

血液肿瘤科

四川大学华西第二医院

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