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侯玲:PAX2诱导NRP-1表达促进肾小管上皮细胞间充质转化和肾纤维化的研究 PPT讲座视频 中华医学会第二十一次全国儿科学术大会
标题: PAX2诱导NRP-1表达促进肾小管上皮细胞间充质转化和肾纤维化的研究
讲者: 侯玲
单位: 中国医科大学
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论文摘要: 目的  研究配对盒基因2(PAX2)诱导肾小管上皮细胞间充质转化(EMT)过程中对神经纤毛蛋白-1(NRP-1)表达的影响和NRP-1在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型肾脏纤维化进展中的表达情况,探讨PAX2致肾小管EMT的作用机制。
方法  1、离体实验:构建PAX2慢病毒表达载体转染正常大鼠肾小管上皮细胞系(NRK52E),将实验细胞分为转染组、空载对照组、空白组;采用Western blot和real-time PCR方法检测上皮细胞标志物E钙黏蛋白(E-cadherin)及间充质细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况,采用Western
blot、免疫荧光及real-time PCR方法检测NRP-1的表达情况。2、在体实验:雄性Wistar大鼠60只,随机分为假手术组(n=30,行左侧输尿管分离术)、模型组(UUO,n=30,行左侧输尿管结扎术)各组大鼠分别在术后3d、7d、14d、21d、28d各取6只,留取肾组织标本。用HE、Masson染色观察肾组织病理变化,采用Western blot及免疫组化方法检测E-cadherin和α-SMA的表达情况,采用Western blot、免疫组化及real-time PCR方法检测PAX2和NRP-1的表达情况。
结果  离体实验:与对照组相比,PAX2转染组NRP-1的mRNA和蛋白表达均较对照组明显增加(P<0.05),PAX2转染组α-SMA蛋白表达增加(P<0.05),E-cadherin蛋白表达减少(P<0.05)。在体实验:与假手术组相比,不同时间点UUO大鼠肾组织纤维化程度明显,E-cadherin蛋白表达减少(P<0.05),α-SMA蛋白表达增加(P<0.05),PAX2和NRP-1的mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.05)。
结论  PAX2可能通过诱导NRP-1的高表达促进肾小管上皮细胞EMT,参与肾脏纤维化的进展。

小儿肾脏风湿免疫科

中国医科大学

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