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刘航:富含半胱氨酸蛋白61对缺血性肾纤维化及肾成纤维细胞的作用研究 PPT讲座视频 The 8th Asia Pacific Chapter Meeting of International Society for Peritoneal Dialysis (APCM-ISPD 2017)
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标题： 富含半胱氨酸蛋白61对缺血性肾纤维化及肾成纤维细胞的作用研究
讲者： 刘航
单位： 青岛大学医学院附属医院
关键词：
富含半胱氨酸蛋白61 成纤维细胞 肾纤维化 急性肾损伤 缺血再灌注 衰老
播放： 1402
论文摘要： 目的 探讨富含半胱氨酸蛋白61(cysteine-rich protein 61, Cyr61)在缺血性肾纤维化组织及活化的肾成纤维细胞中的表达，对肾脏成纤维细胞纤维化表型的抑制作用及可能机制。
方法 （1）制备缺血性急性肾损伤（AKI）致肾纤维化的大鼠模型，采用生化检测和组织病理切片Masson染色方法评估大鼠肾功能及纤维化，PCR及Western免疫印迹方法检测纤维化指标Col1α1、Col3α1和Cyr61基因和蛋白表达情况。（2）TGF-β1浓度梯度（0, 0.5, 1, 2 ,5ng/ml）诱导活化NRK-49F细胞48 h，CCK8方法检测细胞增殖活性，Western免疫印迹方法检测胶原纤维Col3和Cyr61蛋白表达。（3）质粒转染方法构建过表达及低表达Cyr61的NRK-49F细胞，CCK8方法检测细胞增殖，溴化乙锭（PI）染色后流式细胞仪分析细胞周期，PCR及Western印迹检测纤维化指标（Col1α1、Col3α1、mmp9、mmp13）、细胞衰老指标（P53、P21、Rb1、p16）以及Cyr61的基因和蛋白表达变化。
结果 （1）大鼠缺血性急性肾损伤所致肾纤维化、TGF-β1浓度梯度活化的NRK-49F细胞的纤维化表型与其分泌的Cyr61蛋白存在一定的相关性；（2）Cyr61以时间依赖性的方式抑制NRK-49F细胞的增殖活性，48h作用明显；（3）过表达的Cyr61能减少活化的NRK-49F细胞分泌促纤维化因子Col1α1和Col3α1，同时增加抗纤维化因子mmp9和mmp13的表达；（4）过表达的Cyr61能促进活化的NRK-49F细胞周期停滞在G1期，促进细胞衰老信号通路基因P53、P21和Rb1的表达，对p16基因表达影响不大。
结论 Cyr61抑制肾成纤维细胞的增殖及纤维化表型的分泌，从而减缓肾纤维化进程，P53/P21/Rb1细胞衰老信号通路可能参与了Cyr61的抑纤维化作用。
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刘航

肾内科

青岛大学附属医院

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