标题:
低温保存人卵子的”CPA-free” 激光复温新技术研究
讲者:
裘娟
单位:
大连市妇女儿童医疗中心
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论文摘要:
目的:人卵子保存相比于胚胎保存更加困难,成活率的公开报道也有很多争议。可能的原因是卵子的低温生物学特性有别与胚胎。本研究尝试使用CPA-free(CPA:Cryoprotectant, 低温保护剂) 激光复温冷冻样品的新技术和探索开发人卵子低温保存新方案。
方法:实验材料使用临床废弃不成熟的卵子,然后经过IVM培养形成MII卵子(知情同意)。在室温条件下,卵子转移进PBS包含0.72M 蔗糖和0.0062M聚蔗糖的低温保存液中(不含有任何化学性低温保护剂)。保存方法很简单,卵子仅仅经过2分钟脱水处理后,立刻被放置在Cryotop上面,然后在激光保存控制系统(CryoJig)中直接放入液氮中保存。复温的时候样品在CryoJig 中弹出,同时使用激光脉冲系统复温冷冻卵子。复温后的卵子首先进行形态学评测,形态正常的卵子行ICSI技术,后续观察发育情况。
结果:经过初步的研究发现这个激光复温新技术方法对于人的卵子是有效的。对比与小鼠的卵子保存模型实验分析,复温后卵子的形态成活率对比为(90% vs77%); 培养后2细胞形成率(50 % vs 80%)。考虑人的卵子和小鼠卵子的低温生物学特性存在较大的差异,相关实验条件正在进一步优化中。
结论:小鼠动物模型中,激光低温保存系统低温保存卵子获得很高的形态成活率和发育潜能。本研究中,初步得到的结论激光低温保存系统对人卵子保存也是有效的。这可能是第一次尝试不使用任何化学性保护剂保存人卵子的研究,但进一步深入的相关研究是必要的。