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田汝辉:支持细胞分泌因子FGF5通过激活CyclinA促进精原干细胞体外增殖 PPT讲座视频 中国医师协会生殖医学专业委员会第三届学术年会
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标题： 支持细胞分泌因子FGF5通过激活CyclinA促进精原干细胞体外增殖
讲者： 田汝辉
单位： 上海市第一人民医院
关键词：
播放： 1471
论文摘要： 目的：支持细胞是构成生精微环境最重要的体细胞，支持细胞异常将影响生精微环境并导致睾丸功能障碍。转录组学研究提示FGF5在梗阻性无精子症(Obstructive azoospermia, OA)和唯支持细胞综合征(Sertoli-Cell-Only Syndrome, SCO)患者睾丸支持细胞表达量差异巨大，提示其调控精子发生的重要功能。本研究旨在探索FGF5在人睾丸组织细胞的表达及其对精原干细胞增殖的调控作用。
方法：选取OA和SCO患者睾丸组织，采用两步酶、差异贴壁和MACS方法分选得到人支持细胞和精原干细胞；在基因和蛋白水平检测FGF5及其受体FGFR1和FGFR2在支持细胞和精原干细胞的表达；通过向体外培养的精原干细胞系中添加FGF5因子，采用CCK8和EdU染色方法检测FGF5对细胞增殖的调控作用；采用western-blot方法检测增殖相关蛋白水平。
结果：我们通过PCR证实FGF5表达于人支持细胞，并且其在SCO患者支持细胞的表达量与OA患者相比明显降低。同时，我们发现FGF5的受体FGFR1和FGFR2表达于精原干细胞。我们进一步通过免疫荧光染色和western-blot方法证实了FGF5及其受体在蛋白水平的表达。这提示人支持细胞能够分泌 FGF5，其可通过旁分泌途径作用于精原干细胞上的受体，参与调控人精原干细胞的增殖。我们进一步采用CCK8检测FGF5对细胞增殖的影响，我们发现FGF5能够促进精原干细胞的增殖，并且这种促进具有时间和剂量依赖性。EdU实验证实FGF5因子处理后细胞增殖活性增强、Western-blot发现FGF5处理后，细胞PCNA、Cyclin A等表达升高。
结论：FGF5通过调控CyclinA调控精原干细胞的增殖，该作用具有时间和剂量依赖性。本研究为揭示SCO的发病机制提供了新依据，为精子发生信号通路研究提供了新的方向。
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田汝辉

泌尿外科

上海市第一人民医院

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