标题:
东南亚缺失型α地中海贫血的胚胎植入前遗传学诊断
讲者:
李哲涛
单位:
柳州市妇幼保健院医学遗传科
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论文摘要:
目的 探讨荧光聚合酶链反应(PCR)结合毛细管电泳技术在东南亚缺失型α地中海贫血(--SEA/αα)胚胎植入前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis,PGD)中的临床应用。 方法 利用PCR结合毛细管电泳的方法对本院生殖助孕中心24对携带东南亚缺失型α地贫夫妇进行胚胎植入前遗传学诊断,于D5、D6的囊胚期胚胎进行活检,获取得滋养外胚层细胞进行检测。根据胚胎基因检测结果结合胚胎评分,挑选优质胚胎进行移植。选择移植胚胎的原则为:首选无携带特定疾病基因突变的胚胎,次选杂合子胚胎;在无突变纯合子胚胎的基础上,优先移植D5优质囊胚;优质囊胚选择顺序为:AA>AB>BA>BB>BC。临床妊娠后16~20周经穿刺取羊水样本进行产前诊断并与PGD结果进行比对。结果 对24对夫妇进行24个周期PGD,共检测202个胚胎,获得202份囊胚期滋养外胚层细胞,其中检测成功为188个,成功率为93.07%(188/202)。经毛细管电泳分析,共诊断出35个正常胚胎,102个杂合子胚胎,51个重型地贫胚胎。移植了20个胚胎,12例获得临床妊娠。妊娠的12例孕妇中,孕18周进行羊水穿刺产前诊断4例,其中3例检测结果与PGD实验结果一致,1例发生等位基因脱扣;流产2例,1例孕7周流产,流产物检测结果与PGD结果一致,1例孕11周流产,流产物未送检,其余6例未到检测时间。 结论 等位基因脱扣(allele dropout,ADO)为本研究方法不可避免的实验缺陷,最终结果只会导致两种情况:1.会将正常的胚胎误认为是杂合胚胎,导致误诊。2.将杂合子的胚胎误认为致病胚胎而影响妊娠率。上述无论哪种情况的发生,都不会对胎儿或孕妇造成不可挽回的影响。因此,应用荧光PCR结合毛细管电泳技术可对携带东南亚缺失型α地贫的夫妇进行植入前遗传学诊断。