标题:
新型卵巢癌相关抗原CA166-9在卵巢癌细胞的生物学功能研究
讲者:
张琛
单位:
北京大学人民医院
播放:
1945
论文摘要:
研究目的:卵巢癌病死率居妇科恶性肿瘤之首,因早期无明显症状同时缺乏有效的早期筛查方法使卵巢癌确诊时已为晚期,五年生存率一直徘徊在30%左右。因此寻找有效的早期筛查指标及治疗方法成为研究的重点。COC166-9单克隆抗体是由北京大学人民医院妇科肿瘤实验室使用卵巢癌浆液性乳头状囊腺癌可溶性抗原免疫小鼠制备的单克隆抗体。前期研究发现COC166-9单抗对应的抗原为人免疫球蛋白样分子(IGHG1),并命名为CA166-9。免疫组化实验证实CA166-9在上皮性卵巢癌中表达率约为80%。本研究主要探讨CA166-9在卵巢癌发生发展中的生物学作用。
材料与方法:首先利用qRT-PCR、Western Blot的方法检测CA166-9在卵巢癌不同细胞系中的表达情况。构建pcDNA3.1-CA166-9过表达载体并设计siRNA,分别将其转染至CA166-9低表达及高表达的卵巢癌细胞系中。MTS、流式细胞仪检测细胞周期和凋亡,克隆形成实验检测CA166-9对卵巢癌细胞的增殖和凋亡的影响,Transwell小室实验检测CA166-9对卵巢癌细胞体外侵袭迁移能力的影响。免疫组化检测CA166-9在卵巢癌患者肿瘤组织中的表达并分析其表达与临床指标的关系,最后通过Western Blot检测CA166-9与EMT相关分子的关系。
实验结果:OC3及3AO细胞为CA166-9低表达细胞系用于CA166-9过表达实验,SKOV3与Caov-3细胞为CA166-9高表达细胞系,用于CA166-9敲降实验。通过CA166-9过表达实验发现CA166-9可以促进卵巢癌细胞体外侵袭迁移能力,而不影响细胞增殖及抗凋亡能力。敲降CA166-9后细胞的侵袭迁移能力明显减弱,而增殖及抗凋亡的能力无明显改变。免疫组化提示CA166-9阳性表达与患者淋巴结转移正相关。同时发现CA166-9促进卵巢癌细胞侵袭迁移可能是通过促进N-cadherin、Vimentin,降低E-cadherin的表达来实现。
结论:CA166-9可能通过增强卵巢癌细胞的体外侵袭迁移能力来促进卵巢癌的发生发展。这一发现对探索COC166-9单抗用于卵巢癌临床治疗提供一定基础。