论文摘要:
研究目的:研究miR-652在子宫内膜样腺癌(EAC)中的表达并探索其在子宫内膜癌中的作用机制,为子宫内膜癌的治疗提供新的方向。
材料与方法:分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库子宫内膜癌中microRNA的表达谱数据,发现子宫内膜癌与正常子宫内膜的差异表达的microRNAs。应用实时定量PCR(RT-PCR)验证miR-652在子宫内膜癌和正常子宫内膜组织中的表达差异。通过血管生成实验验证miR-652在子宫内膜癌中对血管生成作用的影响。通过靶基因预测数据库发现THBS1可能是miR-652的作用靶点,并通过RT-PCR和western blotting在mRNA和蛋白水平进行验证。
结果:1.筛选出58个在子宫内膜癌和正常子宫内膜组织中差异表达的microRNAs(fold change>2倍)。2. 在30例子宫内膜组织和15例正常组织中验证,mir-652在子宫内膜癌组织中的表达明显高于正常子宫内膜组织(fold change=2.91,p<0.05)。3. 通过TCGA数据分析发现,miR-652的表达与子宫内膜的分化水平相关,低分化子宫内膜癌miR-652表达水平较高,且miR-652的表达水平与子宫内膜癌的预后有明显的相关性,随着miR-652表达水平的升高PFS缩短。4.过表达子宫内膜癌细胞系中的miR-652,可明显促进血管生成(p<0.05);反之,干扰子宫内膜癌细胞系中mir-652的表达,对血管生成有明显的抑制作用。5.生物信息学分析发现THBS1可能是mir-652的靶基因, THBS1在mRNA水平与miR-652的表达水平无明显相关,但在蛋白水平的表达与mir-652在子宫内膜癌细胞系及组织中的表达呈负相关,提示miR-652可能在转录后水平调控THBS1的表达。
结论:本研究发现miR-652可能通过靶向THBS1促进子宫内膜癌的血管生成,为子宫内膜癌的治疗提供新的靶点。