论文摘要:
目的 常规体外受精-胚胎移植技术从技术上解决了不孕不育难题,然而为了保证一定的临床妊娠率,通常移植2-3枚胚胎,由此也增加了多胎妊娠,因此提高IVF临床妊娠率的同时又能避免多胎妊娠一直是辅助生殖工作者面临的挑战。规避多胎妊娠风险又能保证临床妊娠率最公认有效的方法就是实行单囊胚移植,但是目前人囊胚形成率仅约50%左右,如果全部实行囊胚培养将有2-40%的患者会因胚胎没有发育到囊胚而取消移植。因此改进胚胎体外培养体系提高囊胚形成率和改善囊胚质量对单囊胚移植的普遍开展具有重要的作用。方法与结果 本研究利用多肽组学对形成囊胚的胚胎培养液和未形成囊胚的胚胎培养液中的多肽进行差异分析,两组培养液中共鉴定出多肽3228条,其中形成囊胚组与未形成囊胚组差异显著的有201条(差异倍数>2,T-test,P< 0.05),分析发现,这些多肽主要由5-21个氨基酸组成,分子量在500-2500Da之间,PI位于3-10。我们采用IPA软件分析发现,这些分泌型多肽的功能涉及细胞黏附、脂质代谢、糖代谢、蛋白水解等,与胚胎发育和植入密切相关。我们按照质谱信号高、组内差异小、组间差异显著及多肽稳定性高的原则,选择6条多肽(前体蛋白分别为HERC2、PCD16、CD109、EEPD1、ABCC8、UBR4),在小鼠胚胎发育中观察表型:将合成的多肽添加到胚胎培养液中培养至囊胚,发现HERC2来源肽可显著提高小鼠囊胚形成率(71.1%/53.6%,P< 0.05),CD109来源肽可显著降低小鼠囊胚形成率(46.8%/76.7%,P< 0.05),其余肽均无明显作用。结果提示HERC2来源肽可能具备生物学活性参与囊胚形成过程。结论 综上所述,对于人胚胎分泌肽的研究将为临床上人囊胚培养基成分的改进提供了初步的实验基础,有助于单囊胚移植的普遍推广,最终实现提高临床IVF 临床妊娠率的同时又能避免多胎妊娠。
基金项目:江苏省自然科学基金(优秀青年项目)