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刘宇:卵泡液中游离线粒体DNA与卵母细胞发育能力的关系及机制的研究 PPT讲座视频 中华医学会第十二次全国生殖医学学术会议
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标题： 卵泡液中游离线粒体DNA与卵母细胞发育能力的关系及机制的研究
讲者： 刘宇
单位： 华中科技大学同济医学院计划生育研究所
关键词：
卵泡液 游离线粒体DNA 卵母细胞发育能力 颗粒细胞 凋亡
播放： 1204
论文摘要： 【目的】探索卵泡液中游离的线粒体DNA（Cell-free mitochondrial DNA，cfmtDNA）与卵母细胞发育能力的关系及其可能的机制。
【方法】收集2018.3~2018.7在华中科技大学同济医学院生殖医学中心进行IVF/ICSI的224份单个的卵泡液样本运用Q-PCR分别对cfDNA和cfmtDNA进行检测；以cfmtDNA/cfDNA比值为指标，分析其与相应卵母细胞成熟、受精及胚胎评分及囊胚形成之间的关系。体外培养C57BL/6J小鼠卵巢颗粒细胞，用cfmtDNA处理小鼠卵巢颗粒细胞，通过检测颗粒细胞凋亡水平、凋亡基因（caspase3、caspase9、Bcl2、Bax）的表达水平以及颗粒细胞培养液中雌孕激素的水平，确定cfmtDNA对颗粒细胞的功能及凋亡水平的影响；通过检测TLR9、NF-kB、MAPK蛋白的表达变化，确定cfmtDNA影响颗粒细胞功能的途径。
【结果】有卵组卵泡液中cfmtDNA/cfDNA的比值均高于空卵泡组 ( P<0.05)。卵子受精组与未受精组cfmtDNA/cfDNA的比值无差异；优质胚胎组和非优质胚胎组中cfmtDNA/cfDNA的比值无差异；然而，形成可用囊胚组cfmtDNA/cfDNA的比值比未形成囊胚组显著降低( P<0.05)。CfmtDNA（10-3ng/ul，2h）降低小鼠卵巢颗粒细胞存活率( P<0.05)，并诱导细胞凋亡：与对照组相比，caspase3、caspase9和Bax mRNA及蛋白表达水平均上调(P<0.05) ，Bcl2 mRNA及蛋白表达水平下调 (P<0.05)；但cfmtDNA处理组与对照组比较，雌孕激素的分泌量未见差异。小鼠卵巢颗粒细胞可见TLR9蛋白的表达，cfmtDNA处理组NF-kB、MAPK蛋白表达水平增加。
【结论】卵泡液中cfmtDNA的水平可能影响卵母细胞的发育能力，其机制可能是cfmtDNA与颗粒细胞上TLR受体结合，激活NF-kB、MAPK通路，诱导卵巢颗粒细胞凋亡有关。
 
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刘宇

生殖医学科

华中科技大学同济医学院湖北妇幼保健院

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