标题:
Potential Role Of Long Noncoding RNA ASO3491 And E2F2 In Spermatogenesis Of Non-obstructive Azoospermia
讲者:
傅赟星
单位:
宁夏医科大学
播放:
1006
论文摘要:
目的:探讨非阻塞性无精子症(NOA)患者人睾丸组织中长链非编码RNA(lncRNA)和mRNA的表达特征,并确定lncRNA ASO3491和E2F2在NOA精子发生中的潜在作用。
材料与方法:通过生信分析分别收集NOA患者(n = 3),匹配对照(n = 3)和阻塞性无精子症(n = 3)的睾丸组织样本,通过微阵列评估lncRNA和mRNA表达谱。我们通过生信分析预测了显着差异表达的lncRNA的靶基因,然后GO分析、Gene Pathway分析挑选候选基因。候选lncRNA和mRNA用于通过实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)在睾丸组织及患者血清中进一步验证。最后,通过ELISA、RT-PCR检测来自NOA(n = 40),正常对照组(n = 40)和OA患者(n = 35)的血清E2F2、精浆E2F2的水平。
结果:1.lncRNAs(ASO3491,ENSG00000262188.1和XLOC_010514)和mRNAs(ENST00000428216,ENST00000392112,ENST00000361729,ENST00000262848,ENST00000392038,ENST00000376726)在NOA的睾丸组织中异常表达。 睾丸组织qRT-PCR结果与通过微阵列分析结果符合。
2. 在(www.targetscan.org/vert_60/)和LncBaseV2(https://www.lncrna2target.org/index.jsp)数据库中预测到ASO3491靶向调控E2F2的表达。
3.微阵列分析和qRT-PCR结果表明,与对照组和OA组相比,ASO3491的表达在统计学上显着增加,E2F2显着降低(p <0.05)。
4.血清RT-PCR结果显示lncRNA ASO3491仅在NOA中高表达,E2F2表达无差异(P<0.05)。
5.ELISA结果显示各组血清E2F2水平差异无统计学意义(P> 0.05)。OA组、NOA组和正常组比较精桨E2F2差异无统计学意义(P> 0.05)。与正常组相比,NOA组有统计学意义上的显着下降(P <0.05)。RT-PCR结果与ELISA结果一致。
结论:NOA睾丸组织中lncRNAs和mRNAs的表达谱有明显改变。 ASO3491抑制E2F2的表达可能是非阻塞性无精子症的精子发生中发病机制之一。NOA患者血清中ASO3491高表达可能成为NOA诊断新的生物标志物,研究结果将为男性精子发生的复杂机制和NOA不孕症的治疗提供新疗法。
中国自然科学基金(No. 81660257),宁夏医科大学一流学科建设项目(NXYLXK2017A05),2106年领军人才项目,宁夏医科大学重点项目(XY201807)