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王静:差异磷酸化蛋白质组学揭示IGF1R激酶在人类精子获能过程中的作 PPT讲座视频 中华医学会第十二次全国生殖医学学术会议
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标题： 差异磷酸化蛋白质组学揭示IGF1R激酶在人类精子获能过程中的作
讲者： 王静
单位： 东南大学附属中大医院
关键词：
精子 获能 酪氨酸磷酸化 定量蛋白质组学 IGF1R/INSR
播放： 931
论文摘要： 目的  大量研究表明酪氨酸磷酸化对于精子的获能尤为重要，但是其完整的分子机制和信号通路始终不是很清楚。本课题旨在发现人类精子获能过程中新的发生磷酸化修饰改变的蛋白，以及关键的酪氨酸磷酸化激酶，并进行其功能性研究，为临床相关疾病提供诊断和治疗的候选分子靶标。
方法和结果  我们运用无标记定量磷酸化蛋白质组学策略研究人类精子获能过程中的磷酸化事件，并鉴定到231个磷酸化位点的磷酸化水平升高。NetworKIN激酶预测软件分析显示磷酸化激酶胰岛素生长因子1受体 (IGF1R)/胰岛素受体(INSR)富集最有意义，提示IGF1R/INSR可能是精子获能过程中重要的酪氨酸磷酸化激酶。根据激酶预测的结果，Western Blotting实验证实GSK1904529A(同时抑制IGF1R和INSR激酶活性的抑制剂)和NVP-AEW541(特异性抑制IGF1R激酶活性的抑制剂)抑制了精子获能过程中的酪氨酸磷酸化水平。CASA结果显示，IGF1因子在获能6h时能够诱导精子发生超激活运动，该过程可被GSK1904529A和NVP-AEW541所抑制；而Insulin因子对精子的超激活运动无影响。
结论  综上所述，人类精子获能前后磷酸化修饰差异谱系中预测的IGF1R/INSR激酶可能是精子获能过程中重要的酪氨酸磷酸化激酶。通过功能学实验，我们推测IGF1R介导的酪氨酸磷酸化修饰调控通路在精子获能过程中可能发挥了更为关键的作用，并影响了精子的超激活运动。
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王静

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东南大学附属中大医院

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