标题:
不同年龄小鼠卵母细胞、脂肪干细胞线粒体功能的比较
讲者:
盛小强
单位:
南京大学医学院附属鼓楼医院
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论文摘要:
目的
线粒体功能随着年龄的增加会出现显著的下降。作为细胞内的能量工厂,线粒体在卵母细胞减数分裂、成熟及受精后的胚胎发育中发挥着重要的作用。线粒体的功能障碍是细胞衰老的重要标志之一,老龄小鼠卵母细胞质量的降低和线粒体功能障碍密切相关。本课题主要通过比较老龄(10月)和年轻 (10周)C57BL/6小鼠卵母细胞及脂肪干细胞的线粒体功能改变,以期确认脂肪干细胞是否能作为自体线粒体移植的理想供体来改善卵母细胞线粒体功能,从而改善高龄所致卵母细胞质量下降,为临床上高龄女性(年龄>35岁)因卵母细胞质量差所致妊娠困难提供一种可用有效的治疗手段。
方法
取老龄C57BL/6小鼠及年轻 C57BL/6小鼠卵巢(n=6),对两组小鼠卵母细胞线粒体功能进行比较,评价老龄C57BL/6小鼠卵母细胞线粒体功能是否随着年龄的增加而受损。原代分离老龄C57BL/6小鼠及年轻 C57BL/6小鼠脂肪干细胞及卵巢颗粒细胞,对两组小鼠脂肪干细胞及卵巢颗粒细胞的线粒体功能进行比较,评价衰老对脂肪干细胞、颗粒细胞线粒体功能的影响。
结果
对老龄及年轻 C57BL/6小鼠卵母细胞线粒体功能进行检测。使用JC-1进行卵母细胞线粒体膜电位染色,以红绿荧光强度比值代表线粒体膜电位高低,结果显示,老龄 C57BL/6小鼠卵母细胞线粒体膜电位明显下降(p<0.01)。使用MitoSOX进行线粒体活性氧水平测定,结果示,老龄 C57BL/6小鼠卵母细胞线粒体活性氧水平明显上升( p<0.01 )。
同时进行二者脂肪干细胞及卵巢颗粒细胞线粒体功能进行检测。使用JC-1进行线粒体膜电位染色,结果显示,老龄C57BL/6小鼠脂肪干细胞线粒体膜电位相比于年轻C57BL/6小鼠并没有显著下降。使用MitoSOX进行线粒体活性氧水平测定,结果示老龄C57BL/6小鼠脂肪干细胞线粒体活性氧水平明显低于卵巢颗粒细胞(p<0.01),与年轻C57BL/6小鼠脂肪干细胞没有差异。
结论
随着年龄的增长,以线粒体功能作为评价卵母细胞质量的指标之一,老龄C57BL/6小鼠卵母细胞线粒体功能出现明显的紊乱。脂肪干细胞相较于其他体细胞,其线粒体功能并未受到衰老的显著影响,是自体线粒体移植的理想供体。卵母细胞能量代谢的紊乱是造成其质量降低的重要原因。通过给予脂肪干细胞线粒体补充,或许能够挽救高龄卵母细胞线粒体功能,从而达到提高卵母细胞质量、改善妊娠结局的目的。